等度高效液相色譜儀的系統(tǒng)由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中做相對運動時，經(jīng)過反復多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出，通過檢測器時，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
根據(jù)分析要求選擇適當?shù)臉悠啡軇?，并將樣品溶解或懸浮在溶劑中?/div>
2、色譜柱準備：
檢查色譜柱的狀態(tài)，確保柱子沒有損壞或堵塞。
根據(jù)分析要求選擇適當?shù)纳V柱，并根據(jù)柱子的要求進行條件平衡。
3、儀器準備：
打開UHPLC儀器并啟動相關軟件。
檢查儀器的狀態(tài)，如液相泵、進樣器、檢測器和溫控系統(tǒng)等，確保其正常工作。
設置分析方法，包括流速、梯度程序、檢測器波長和積分時間等參數(shù)。
4、進樣：
使用自動進樣器或手動進樣器將準備好的樣品注入到進樣口。
設置進樣器的參數(shù)，如進樣體積、進樣模式和進樣速度等。
5、運行分析：
開始運行UHPLC儀器，啟動分析方法。
監(jiān)控儀器運行狀態(tài)，確保流速和溫度等參數(shù)穩(wěn)定。
觀察檢測器輸出的信號，記錄數(shù)據(jù)或進行實時數(shù)據(jù)分析。
6、數(shù)據(jù)處理：
使用相關的軟件對得到的色譜圖進行數(shù)據(jù)處理和解析。
根據(jù)分析要求進行峰識別、峰面積測定和定量分析。
記錄和保存分析結果，并進行數(shù)據(jù)報告和解釋。
